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    原理:细胞凋亡中, 染色体DNA双链断裂或单链断裂而产生大量的粘性3'-OH末端,可在 脱氧核糖核苷酸末端转移酶 (TdT)的作用下,将脱氧核糖核苷酸和荧光素、过氧化物酶、碱性磷酸酶 或生物素形成的衍生物标记到DNA的3'-末端,从而可进行凋亡细胞的
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    玻片干后,加50μl TUNEL反应混合液(阴性对照组仅加50μl 荧光素标记的dUTP液)于标本上,加盖玻片或封口膜在暗湿盒中反应37℃×60min。 10 玻片干后加50μl converter-POD于标本上,加盖玻片或封口膜在暗湿盒中反应37℃×30min。 14 拍照后再用苏木素或甲基绿复染,几秒后立即用自来水冲洗。 梯度酒精脱水、二甲苯透明、中性树胶封片。 15 加一滴PBS或甘油在视野下,用光学显微镜进行计数(200~500个细胞)并拍照。 1 脱蜡:用二甲苯浸洗5 min×2次; 2 水化:用梯度乙醇(100%×5 min、100%×3 min、95%×3 min、85%×3 min、70%×3 min、50%×3 min) 3
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    在使用TUNEL试剂盒检测细胞凋亡时,需要使用蛋白酶K、荧光素-dUTP、末端脱氧核糖核酸转移酶(TdT酶)等各种试剂。 此外,还需要设置阳性和阴性对照组。
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