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英文字典中文字典相关资料:


  • 实验员小哈 Western blot关于Stripping(洗膜 膜再生)的 . . .
    如果洗不掉,可以尝试升温(不超过45度)和延长洗膜时间(不超过45分钟)。 需要强调一点:强效的Stripping buffer,能把上一轮的染色条带洗得比较干净,但蛋白样本的损失量也会更多,下一轮染色失败的风险增大。
  • Western Blotting实验详细流程(一) - 知乎
    1、戴干净PE手套剪取PVDF膜(剪角做好记号以区分蛋白面),放入甲醇中浸泡约5min,用ddH2O平衡,再放入转膜液中15min; 2、轻轻撬开玻璃板,按Marker指示切下目的蛋白所在区域的凝胶,浸入转膜液中;
  • WB实战指南(八)之 Stirpping - 丁香通研选
    Stripping膜至少有三种方法: A.用TBST一直洗膜,洗8hrs以上就可以清除多数蛋白的信号,信号过强的蛋白如内参除外。所以,当你的抗体非常弱的时候,孵育过夜实际上相当于stripping,新的信号不会出现,原来的信号也会被漂洗干净,出现白板。
  • Western Blot 什么情况会把膜上的蛋白洗掉? - 知乎
    一般我们实验室用的方法是直接用Washing buffer(1X TBST)反复洗3-4h甚至更长时间,中间更换1-2次TBST,这种方法虽然时间比较长,但是优点是基本不会像洗膜液那样伤害样品蛋白,同时还能有效去除一抗二抗,重新孵育其他抗原。
  • 【求助】做WESTERN时封闭后到底要不要洗了再加一抗?
    封闭时是用封闭液进行的, 封闭后又是要一抗孵育,而一抗一般是用封闭液稀释的, 所以后就没有必要再进行洗涤了! 封闭液用1×TBS加5%(w v)脱脂奶粉配制,没有可见沉淀物的话,你过滤他干啥?
  • 4种WB膜再生液 剥离液-stripping buffer配方和使用方法推荐 . . .
    小编推荐使用配方三,优点是可以常温使用,并且适用于NC和PVDF膜。 根据小编经验,配方三比较温和,亲测一张膜可以反复剥离和敷抗体三次没问题。 剥离效果非常干净,实际上配方三的这个stripping buffer可以重复使用3次以上都没问题。 需要注意的是,配方三需要调pH至2 2,需要加入大量的HCL。 HCL属于危化品,要严格按照危化品的规范使用,并且注意在通风厨中使用,戴手套、穿白大褂和戴护目镜,注意防护自身安全。 如果你觉得有用的话,就帮忙点个「赞」和「再看」吧。 WB实验,NC膜和PVDF膜选哪个比较好? 选对膜让WB实验事半功倍 Endnote插入参考文献的3种方式,写论文插参考文献有救了。
  • 用于重染色的蛋白质印迹膜再生(membrance stripping)方案
    强烈推荐可尽量降低样品蛋白质损失的 PVDF 膜。 还应注意,比色 显色检测试剂会在膜上留下永久可见的印迹,可能干扰相似分子量靶标的后续检测。 推荐例如 ECL 的化学发光试剂,因为它们不会留下印迹,并且比比色试剂更敏感。
  • 8年WB经验整理:Western blot最全操作详解 64个问题分析
    WB实验一般分为SDS-PAGE样本制备、凝胶电泳、转膜、封闭、抗体孵育及免疫检测等步骤。 WB标准流程: 样本制备→凝胶上样、电泳→转膜→封闭→抗体孵育→显影 WB标准流程图(图片来源于网络) 实验开始前一定要做的事情,是 对所研究的目的蛋白在待测样本中的表达水平、蛋白大小、翻译后修饰等背景信息进行深入的了解, 同时也需要设置严格的阴性、阳性对照样本。 这将有助于在实验出现异常结果时进行排查分析。 该蛋白在什么组织中表达? 通过mRNA表达水平给您参考估计不同样本中目的蛋白的表达水平;样本种属可以选择人、小鼠、大鼠等。 还可以链接其他的数据库。 简称HPA数据库,提供人类蛋白质在组织和细胞的分布,并用免疫组化技术。 该蛋白有没有其他的修饰形式?
  • wb洗膜用tbs和tbst的区别 - 百度知道
    wb洗膜和tbst都是在western中用作洗膜的缓冲液,PSBT是磷酸盐缓冲液,TBST是Tris-Hcl缓冲液。wb洗膜和tbst差别主要在于PBST中由PBS加入了Tween20,Tween20是非离子型去污剂。
  • Western blot 抗体洗脱液配方及用法 - 知乎
    a 加入适量蒸馏水装有NC膜或 PVDF膜 的抗体孵育盒中,漂洗5min(液体量能没过膜即可) b 弃掉蒸馏水加入适量抗体洗脱液,摇床上漂洗5min; c 弃掉抗体洗脱液,加入适量 TBST ,摇床上漂洗两遍,5min 次。





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